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细胞培养是生物学中用于仔细培养特定类型细胞的常用技术。 制备细胞培养物时要非常注意保持无菌条件。 它们通常在无菌通风罩中制备,材料在使用前已全部消毒。 然后将细胞培养物小心地放置在培养箱中,以保持无菌和受控的环境,以实现最佳细胞生长。 例如,哺乳动物细胞通常在 37 摄氏度、非常高的湿度和 5-7% 的 CO2 水平的 CO2 培养箱中培养。 这些条件模拟了体内发现的条件。
但这就是您需要担心的全部吗? 最近发现,不需要的振动会在细胞培养箱中起到有害的作用。 由于风扇或水循环加热孵化器,振动可能来自孵化器本身。 更多的时候振动来自环境。
图 1 包含鸡胚成纤维细胞的 100 毫米培养皿中振动诱导的同心环图案,该培养皿在铺板后 1 小时染色。
50 多年来,这些类型的振动问题在十大正规网博平台、光子学和显微镜行业中已广为人知。出于这个原因,这些行业的设备供应商通常会针对将要安装其产品的设施制定振动规范。孵化器并非如此,尽管它可能应该如此。
一些培养箱制造商开始了解振动可能导致的问题。 “培养箱振动是培养容器中出现的一些最奇怪的生长模式的原因。它的作用主要发生在细胞在接种容器后试图最初附着在表面上时。在培养皿中,振动会将细胞推到容器的边缘或中间,或者有时会形成细胞的同心环。图 1 显示了鸡胚成纤维细胞培养物中的这种模式。
这是来自不同孵化器制造商的另一个示例。 “细胞培养瓶中驻波的典型示例如图 2 所示。在这种情况下,驻波已在整个烧瓶中形成。
图 2 当存在驻波时,烧瓶中的细胞培养物生长。
如何消除振动问题?
在典型的细胞培养实验室中,振动可能来自多种来源。除了培养箱风扇外,它们还可以来自放置在培养箱旁边的离心机、打开和关闭的冷冻机或冰箱,甚至来自细胞培养实验室的气候控制系统。由于风扇的结构或风扇电机的位置,可能并不总是能够消除振动。由于振动问题本质上是由于频率共振,您可以尝试改变设备(例如培养箱)的频率,例如在培养箱的一个角落放置重物;但请注意培养箱中潜在的污染风险,并准备采取必要措施将风险降至最低。
虽然这些是尽量减少振动影响的好方法,但在实验室中处理振动问题还有一个更好的方法,即通过将整个培养箱放置在减振平台上,将其与不必要的振动隔离开来
在这种情况下,两个培养箱相互堆叠并放置隔振平台上。 使用空气隔离器支腿来最大程度地减少由其他仪器引起的地板振动传播。 例如,如果离心机在培养箱附近运行,则来自离心机的振动可能会传递到培养箱,从而导致我们在细胞培养物中看到的这些振动模式。 放置于减振平台上的培养箱,它们相对不受来自离心机、人流、HVAC 系统或生命科学设施中常见的其他振动源的振动的影响。